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La cromatografía se usa ampliamente en los laboratorios químicos para determinar la identidad de un componente desconocido. Este componente fluye a través del material de envoltura de la columna e interactúa con las partículas. Las interacciones entre las partículas y los componentes de la muestra se basan en la atracción o solubilidad entre ellos. Se permite que las moléculas que no tienen interacción con las partículas del material de la cubierta pasen a través de él sin obstáculos. El tiempo requerido para que las moléculas pasen desde el punto de inyección al sistema en el pico máximo de una molécula no reactiva es el tiempo muerto de la columna.
Paso 1
Refuerce la muestra desconocida con una pequeña cantidad de un compuesto que no sea retenido por el material de la columna. El compuesto pasará a través de la columna sin interactuar con el material de envoltura en la columna.
Paso 2
Cargue la jeringa con aproximadamente 20 microlitros de la muestra e inserte la aguja de la jeringa en el puerto de inyección. Cargue el bucle de muestra de la válvula vaciando la jeringa en la válvula.
Paso 3
Encienda el instrumento de cromatografía y comience la fase móvil. Esta fase fluye a través del instrumento y toma la muestra a través de la columna y el detector que termina en un recipiente de desechos.
Paso 4
Active la válvula, que permite que la muestra entre en la ruta del flujo de fluido. Esto carga los componentes de la muestra en la parte superior de la columna y comienza la separación.
Paso 5
Monitoree la señal del emisor del detector e identifique el primer pico en el cromatógrafo. La diferencia entre el tiempo de inyección y el máximo del primer pico, representado por el componente de refuerzo, es el tiempo muerto.
Paso 6
Mida la distancia entre el punto de inyección y la altura máxima del primer pico. Multiplica la distancia por la velocidad del papel o el eje para encontrar el tiempo muerto.