Contenido
- instrucciones
- Preparación del extracto de patata
- Preparando la mezcla
- esterilización
- Vertiendo la mezcla
- consejos
- advertencia
- Qué necesitas
Agar patata dextrosa (BDA) es un buen medio de propósito general semisólido utilizado para crear hongos. También es frecuentemente utilizado para aislar, crecer y mantener especies de setas en formación. Platos listos de petri o tubos que contienen BDA pueden ser comprados, o el BDA puede ser rápidamente hecho usando una premezcla comercial. Sin embargo, no es difícil hacer una versión simple y eficaz con un bajo costo.
instrucciones
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Coloque las patatas en una olla con unos 1,2 litros de agua del grifo y deje hervir en una cocina por una hora.
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Tire la olla del fuego y deje enfriar el líquido hasta que pueda manejarse cómodamente (unos diez minutos).
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Vierta el extracto de patata líquida a través de un filtro o gasa y recogerlo a otro recipiente.
Preparación del extracto de patata
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Agregar dextrosa y agar a un litro de agua del extracto de patata.
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Pruebe el pH de la solución con el papel probador de pH o el medidor de pH.
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Si el pH está por encima de 6,5, disminuirlo, añadiendo una gota de la solución de ácido clorhídrico a la vez y haciendo una nueva prueba.
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Si el pH es inferior a 6, ajústelo añadiendo una gota de solución de hidróxido de sodio a la vez y haciendo una nueva prueba.
Preparando la mezcla
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Mezclar bien y dividirlo en lotes más pequeños de 250 mililitros. Despeje en cuatro frascos de 500 ml (cada frasco debe estar lleno hasta la mitad para no hervir).
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Cobra cada vial con un pedazo de papel de aluminio doblado libremente, de modo que la película no caiga, pero tampoco haga un sellado completo.
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Coloque los frascos en una olla de presión.
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Opere la olla a presión de acuerdo con las instrucciones del fabricante para esterilizar el BDA a 121º C a una presión de 103,421 Pa (15 psi) durante 15 minutos.
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Desconecte la olla de presión y deje que vuelva a la presión atmosférica, a continuación, retire los frascos y deje enfriar hasta que puedan ser manipulados.
esterilización
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Alinee los platos de petri sobre una superficie plana.
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Una vez que los frascos se han enfriado a la temperatura de manipulación, pero antes de que el medio empiece a solidificarse, sostenga el frasco con una de las manos y retire la tapa de hoja con la otra mano.
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Para cada plato de petri, quite la tapa con una de las manos, rápidamente llene hasta la mitad con BDA líquido y vuelva a colocar la tapa.
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Repita el paso 3 hasta que todos los platos de Petri estén llenos.
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Si hay cualquier sobra de BDA, recupere el frasco con la tapa de la hoja original, deje enfriar y solidificar, apriete la tapa de aluminio y guarde en una nevera.
Vertiendo la mezcla
consejos
- La mayoría de los hongos crecen bien en condiciones ligeramente ácidas, de modo que el valor final de pH debe estar comprendido entre 6 y 6,5, aunque puede ajustarse a cualquier pH necesario para una especie específica.
- Deje las tapas del plato de petri abierto sólo lo suficiente para permitir que la mezcla a ser vertida hacia dentro y se cubra lo más rápido posible.
- Se necesita práctica para ganar velocidad y eficiencia en el derramamiento de agar en platos de petri.
- Después de enfriamiento y solidificación, los platos de BDA pueden ser envueltos en plástico y almacenados en el frigorífico durante meses.
- La mayoría de las aguas del grifo contienen minerales benéficos para el crecimiento de los hongos, sin embargo, si el agua local tiene concentraciones de minerales extremos o un pH muy alto o bajo, sustituya por agua destilada.
advertencia
- Siga todas las instrucciones de funcionamiento y seguridad del modelo de la olla de presión a utilizar.
- Deje las tapas del frasco sueltas cuando se esterilice en la olla de presión para evitar la súper presurización.
- Utilice guantes resistentes al calor al manipular recipientes calientes.
- Utilice gafas de seguridad cuando utilice la olla a presión cuando retire el BDA esterilizado y durante la fuga.
Qué necesitas
- 300 g de patatas peladas y cortadas
- cacerola
- Cojín de cocina
- Papel probador pH o medidor de pH
- 1 molar de ácido clorhídrico
- 1 molar de hidróxido de sodio
- 4 frascos de vidrio de 500 ml Ehrlenmayer (u otros recipientes de boca estrecha autoclavables)
- 10 g de dextrosa (glucosa) en polvo
- 20 g de agar
- Papel aluminio
- Olla a presión
- Placas de petri estériles